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所谓的「第二代试管婴儿」，就是单精子胞浆内注射（Intracytoplasmic sperm injection, ICSI），是把精子人为地注射进卵细胞。
相对于体外受精的第一代试管婴儿技术，「第二代试管婴儿」并不是技术上的升级换代，而是针对不同不孕不育病因设计出的新的治疗方式。
两者的目的都是使卵子在体外受精。不同的是，第一代技术是将卵子和一定数量的精子放在一起，给它们提供合适的环境，靠精子自身来完成受精过程；而第二代技术，则是将人为选出的一条精子借助设备注射到卵子中完成受精。
第二代技术对卵子是有损害的，目前还没有确切的证据表明这种方式会对后代造成何种伤害，但大部分胚胎学家都倾向于谨慎使用该技术。
不过，关于第二代试管婴儿技术对卵子的伤害也没必要过分担心，通过这项技术生下的后代已经可以以百万计了。第一代试管婴儿技术的受精方式有时候会导致多条精子同时钻进卵子里完成受精，或出现不受精等问题。第二代技术的一个显著优点，就是提高了「可利用胚胎」的数目。所以，具体采用何种受精方式，或者是采用两种技术使用各半数卵子的方式，都要取决于主治医生的判断。
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